AAT Bioquest16052 MitoROS™ 580 *Optimized for Detecting Reactive Oxygen Species (ROS) in Mitochondria* 500 Tests 

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美國AAT Bioquest Inc.(前身是ABD Bioquest，Inc.)是一家為從事生命科學研究、診斷研發及藥物開發的科學家研發、生產和銷售生物分析研究試劑和試劑盒的公司。公司致力于光譜學檢測領域，包括吸收（顏色），熒光和發光技術。AAT Bioquest的產品幫助quan世界的科學家和生物醫藥研究者更好的了解生物化學，免疫學，細胞生物學和分子生物學等領域。AAT Bioquest會不斷介紹新產品，快速的豐富各個領域的產品。

AAT Bioquest 16052 MitoROS™ 580 *Optimized for Detecting Reactive Oxygen Species (ROS) in Mitochondria* 500 Tests，產品簡介：

產品品牌：AAT Bioquest

產品貨號：16052

產品名稱：MitoROS™580*優化用于檢測線粒體中的活性氧（ROS）*

英文名稱：MitoROS™ 580 *Optimized for Detecting Reactive Oxygen Species (ROS) in Mitochondria*

產品規格：500 Tests

 AAT Bioquest優化用于檢測線粒體中的活性氧

產品說明：

活性氧（ROS）是含有氧的化學反應分子。實例包括超氧化物、羥基自由基、單線態氧和過氧化物。由于存在不成對的價殼電子，ROS具有高度反應性。ROS是氧氣正常代謝的天然副產物，在細胞信號傳導和體內平衡中具有重要作用。然而，在環境壓力（例如紫外線或熱暴露）期間，ROS水平會急劇增加。這可能會對細胞結構造成嚴重損害。累積起來，這被稱為氧化應激。MitoROS™ 580是一種超氧化物敏感染料，在加載到活細胞中時定位于線粒體中。MitoROS™ 580被超氧化物氧化產生紅色熒光。MitoROS™ 580 可用于使用熒光顯微鏡或熒光流式細胞儀監測線粒體中的超氧化物。MitoROS™ 580試劑滲透到活細胞中，選擇性地靶向線粒體。它被超氧化物迅速氧化。它不太可能被其他活性氧（ROS）和活性氮（RNS）氧化。氧化產物在細胞中具有高熒光。MitoROS™ 580為研究各種病理中的氧化應激提供了有價值的工具。

示例協議

一目了然

重要說明

此協議僅提供指南，應根據您的特定需求進行修改。在制作MitoROS™ 580工作溶液之前根據需要處理細胞。

儲備液的制備

除非另有說明，否則所有未使用的儲備溶液應分成一次性等分試樣，并在制備后儲存在-20°C。避免反復凍融循環。

1. MitoROS 580 儲備溶液 （1000X）將 13 μL DMSO 加入 MitoROS™™ 580 小瓶中并充分混合。

注意：未使用的儲備溶液可以儲存在-20oC.避光。

工作溶液的制備

MitoROS™ 580工作溶液（2X）：

將DMSO儲備溶液稀釋到具有20 mM Hepes緩沖液（HHBS）的Hanks溶液中，制成2X工作溶液。注意：2X MitoROS™ 580工作溶液不穩定，請及時使用。

實驗方案樣本

1. 根據需要處理細胞。

2. 將細胞（例如100μL/孔在96孔板中）與等體積的2X MitoROS™ 580工作溶液在10°C下孵育30-37分鐘，避光。注意：MitoROS™ 580的最終細胞濃度不應超過1 X.濃度超過1 X會產生細胞毒性作用，包括線粒體形態改變以及熒光重新分布到細胞核和細胞質。注意：不同的細胞對MitoROS™ 580的反應不同，相應地調整工作濃度。

3. 輕輕洗滌細胞三次，然后用HHBS緩沖液代替。

4. 使用適當的熒光儀器（例如熒光顯微鏡，流式細胞儀）分析細胞，Ex / Em = 510 / 580 nm。

  AAT Bioquest優化用于檢測線粒體中的活性氧

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